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蛋白質(zhì)電泳儀的工作原理基于電場(chǎng)作用下蛋白質(zhì)在凝膠介質(zhì)中的遷移行為。具體來(lái)說(shuō),蛋白質(zhì)樣品被置于凝膠中,通過(guò)施加電壓形成電場(chǎng),使帶電的蛋白質(zhì)分子向正極或負(fù)極移動(dòng)。由于不同蛋白質(zhì)的電荷、分子量和構(gòu)象存在差異,它們?cè)陔妶?chǎng)中的遷移速度不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。
在電泳過(guò)程中,蛋白質(zhì)的電荷由其氨基酸側(cè)鏈的解離狀態(tài)決定,而遷移速率則主要受分子量和電荷的影響。例如,在SDS-PAGE中,蛋白質(zhì)在SDS作用下變性并帶負(fù)電,遷移速度主要取決于分子量。此外,凝膠的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)也會(huì)影響蛋白質(zhì)的遷移,如多糖基質(zhì)的孔徑大小和蛋白質(zhì)與凝膠之間的相互作用。
電泳儀通常包括電極箱、凝膠槽和緩沖液系統(tǒng),通過(guò)高壓電源產(chǎn)生均勻的電場(chǎng),使蛋白質(zhì)在凝膠中按分子量大小分離。分離后的蛋白質(zhì)條帶可通過(guò)染色或檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行可視化分析。
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